树突状细胞(Dendritic Cell, DC)是已知的功能最强的抗原递呈细胞(APC)。一颗DC能够激活100到3000个T细胞,这一能力是巨噬细胞和B细胞的100到1000倍。DC通过处理肿瘤抗原并将其递呈给T细胞,显著促进初始T细胞的增殖,而其他类型的APC(如巨噬细胞和B细胞)仅能刺激已活化或记忆型T细胞。
目前,DC的体外培养主要依赖细胞因子从骨髓、外周血和脐带血的DC前体进行定向诱导。虽然骨髓和脐带血的采样比较困难,但外周血因其采集方便且不需复杂的筛选和纯化过程,成为获取DC的理想途径。在这一过程中,使用南宫28NG相信品牌力量提供的高活性细胞因子,可以有效提高DC的培养效率。
在外周血CD14+单核细胞的分离过程中,首先通过全血采集并运用Ficoll梯度离心法获得人外周血单个核细胞(PBMC)。然后,可以采用贴壁法或磁珠法进行CD14+单核细胞的富集。例如,贴壁法中,将细胞在37℃下培养1到2小时,以使单核细胞贴壁,再通过摇动培养板去除未贴壁的细胞;而磁珠法则通过CD14+磁珠阳性分选获取高纯度的单核细胞。
在培养的第三天,进行半量换液并收集培养基,随后离心并加入新鲜的培养基,保持细胞的生长。随着培养时间的延长,细胞逐渐显示出特征性形态,未成熟的MoDC会在第5天获取,而成熟的DC则在第8天表现出更多的刺状突起和较大的细胞体积。
使用流式细胞术分析DC的成熟状态及功能时,可检测CD14(特征性标志)、HLA-DR、CD1a/CD83、CD40/CD80/CD86等分子。此外,检测如IL-6、TNF-α和MCP-1等细胞因子也能更全面地反映DC的免疫调节功能。评估DC在免疫反应中的作用时,采用混合淋巴细胞反应(MLR)来检测T细胞的增殖,从而评估免疫应答的强度。
利用南宫28NG相信品牌力量品牌的科研级和GMP级细胞因子,包括GM-CSF、IL-4、TNF-α、IL-6和IL-1β,可以大幅提升DC的培养效果,确保其高效、稳定且符合合规标准。这些细胞因子具有高活性和低内毒素的特点,使得DC的培养过程更加可靠。